ELISPOT

ELISPOT (Enzyme-linked immunosorbent spot)-метод определения клеток (Т-лимфоцитов), секретирующих определенные продукты (цитокины, медиаторы и др.)


elispot-lyme-coinfections-pipettingВ диагностике боррелиоза, наряду с определением специфического гуморального иммунитета (анализы на антитела), используют анализ Элиспот для определения клеточного иммунного ответа (Т-лимфоциты) к антигенам боррелии.

ELISPOT дает и качественную (тип иммунного белка), и количественную информацию (число клеток активированных определенным антигеном).

 

Анализы на антитела к Боррелии Бургдорфери в раннем периоде (в среднем до 3-6 недель после заражения) мало информативны. Достаточно длительное серологическое окно препятствует правильной диагностике и лечению, особенно при стертых проявлениях 1 стадии боррелиоза. Выработка антител в объемах необходимых для диагностики существующими тестами может нарушиться после длительного приема препаратов группы глюкокортикостероидов, цитостатиков. Часто по анализам на антитела не удается контролировать эффективность лечения боррелиоза, так как после проведенного лечения антибиотиками титры антител могут сохраняться длительное время, иногда годы. В случае хронической персистирующей инфекции низкая информативность анализов на антитела связана с малым количеством возбудителя, с преобладанием л-форм бактерий и нарушениями в иммунном ответе.

Анализ методом ELISPOT поможет устранить недостатки серологических тестов.

Уникальная высокая чувствительность ELISPOT анализа дает возможность идентификации даже малочисленных клеточных популяций при антиген-специфичных ответах. Такая высокая чувствительность, во многом, определяется тем, что детектируемый продукт в момент анализа находится на поверхности секретирующей клетки, будучи связан с ее рецепторами до того, как он растворится в жидкой фазе после центрифугирования или деградирует. Это делает ELISPOT анализ значительно более чувствительным, чем ИФА. Пределы его чувствительности ниже 1/100 000, что делает этот метод очень полезным для мониторинга антиген-специфичных ответов в различных областях иммунологических исследований, в том числе при инфекционных заболеваниях.

Преимущества анализа Borrelia ELISPOT:elispot-lyme-coinfections-separation

  • обладает высокой чувствительностью и может обнаружить даже одну единственную Т-клетку реагирующую на инфекцию
  • от 20 до 200 раз более чувствителен, чем обычный ELISA (ИФА)
  • подходит для диагностики как свежей инфекции, так и хронической формы боррелиоза
  • может быть полезным при мониторинге лечения. Обычно ELISPOT становится  отрицательным примерно от 4 до 8 недель после завершения эффективной терапии.

Антигены в анализе Borrelia ELISPOT:

  • Антиген Borrelia burgdorferi полностью: Borrelia burgdorferi B31-эталонный штамм Borrelia burgdorferi sensu stricto
  • Сочетание белков Borrelia burgorferi: OspA Borrelia burgdorferi sensu stricto , Borrelia afzelii, Borrelia garinii + OspC нативный + DBPA рекомбинантный
  • Borrelia burgdorferi LFA-1 (функциональный белок лимфоцитов ): собственный белок организма+ Borrelia burgdorferi sensu stricto (эпитоп). Показатель часто ассоциируется с аутоиммунными заболеваниями: коллагенозы, ревматоидный артрит, васкулит.

Elispot Lyme coinfections result reader
В лаборатории ArminLabs анализ методом ELISPOT  доступен для диагностики инфекций, вызванных возбудителями: