SARS-CoV-2 iSpot (SARS-Mix)

Опис

SARS-CoV-2 iSpot (SARS-Mix):

Преимущества SARS-CoV-2 iSpot
— Эффективное, непрямое выявление предшествующего заболевания COVID-19
— дифференцированное изображение иммунного ответа для демонстрации развития течения заболевания и иммунитета после перенесенной инфекции
— современный метод клеточного тестирования для дифференциации инфекций гриппа и COVID-19
— очень вероятен базовый клеточный иммунитет — вопрос о базовом иммунитете через клеточную иммунную систему после предыдущего контакта с глобально эндемичными коронавирусами
— если обнаружены специфические для SARS-CoV-2 клоны Т-клеток, это не только свидетельство предыдущего контакта с вирусом, но и может указывать на существующий клеточный иммунитет

Пандемическая вспышка SARS-CoV-2 и ее влияние на население планеты свидетельствуют о необходимости разработки методов тестирования, позволяющих отслеживать течение инфекции. Особое значение имеют соответствующие диагностические, прогностические и терапевтические подходы. Полная диагностика, учитывающая все составляющие иммунной системы, необходима для определения иммунитета к SARS-CoV-2, чтобы начать целенаправленные меры в случае возобновления локальных вспышек в будущем.
У большинства заболевших инфекция протекает клинически бессимптомно или умеренно. Однако в некоторых случаях инфекция вызывает тяжелое течение, которое может привести к смерти.
Помимо установленного RT-PCR для подтверждения острой инфекции, частью диагностики является определение гуморального иммунного ответа против SARS-CoV-2. Выявление антител проводится с помощью тест-систем ELISA. Однако в отношении возможного иммунитета и индивидуально быстро снижающихся титров антител они вызывают много споров среди экспертов относительно их достоверности.
Клеточный иммунитет может быть проверен как еще одна составляющая полной диагностики. В то время как антитела прикрепляются к патогенам, таким как вирусы и бактерии, и уничтожают их, Т-клетки прикрепляются к больным клеткам организма, таким как опухолевые клетки или клетки, зараженные вирусами. Т-клетки также помогают привлечь другие иммунные клетки к месту поражения.

CoV-iSpot, разработанный AID, обнаруживает IFN-γ и IL-2 ответы патоген-специфических активированных Т-клеток против SARS-CoV-2 (смесь пептидов SARS-CoV-2) и Coronaviridae в целом (смесь пептидов PAN-Corona). Пептидная смесь SARS-CoV-2, разработанная AID, содержит только высокоспецифичные последовательности иммунодоминантных эпитопов SARS-CoV-2. Для отличия от других коронавирусов в состав CoV-iSpot включена вторая пептидная смесь со специфичными последовательностями консервативных регионов семейства Coronaviridae (PAN-Corona Peptide Mix).

Обнаружение реактивных Т-клеток (эффекторных клеток) против патогена, такого как SARS-CoV-2, указывает на контакт и, следовательно, на острую или перенесенную инфекцию, независимо от того, были ли выработаны антитела.
Интерферон гамма — это провоспалительный цитокин, который в основном вырабатывается активированными Т-клетками и NK-клетками. Высвобождение IFN-γ эффекторными клетками в качестве ведущего цитокина указывает на доминирующий иммунный ответ TH1.
Интерлейкин 2 регулирует деятельность Т-лимфоцитов. Он способствует активации и экспансии Т-клеток, а также дифференцировке CD8+ Т-клеток в клетки памяти. В CoV-iSpot обнаружение только IFN-γ-продуцирующих эффекторных клеток свидетельствует об иммунном ответе в контексте инфекции SARS-CoV-2. Обнаружение IL-2 или одновременное обнаружение IFN-γ и IL-2 предполагает наличие клеток памяти, что свидетельствует о перенесенной инфекции SARS-CoV-2 с возможным клеточным иммунитетом.

Клиническая значимость
Приобретенная иммунная защита принципиально различается на гуморальный и клеточный иммунный ответ. Клеточный иммунный ответ зависит от Т-клеток. Т-клетки делятся на различные субпопуляции (например, Th1 и Th2), которые выделяют различные цитокины в зависимости от своей функции. Некоторые из этих цитокинов запускают гуморальный иммунный ответ. Таким образом, Т-клетки находятся в начале приобретенных защитных механизмов. Различные субпопуляции Т-клеток формируют центр как гуморального, так и клеточного иммунного ответа.
Эффекторные Т-клетки — это непосредственно активированные и дифференцированные Т-клетки, обладающие провоспалительными свойствами. Они образуются из наивных Т-клеток после контакта с соответствующим антигеном во время инфекции или вакцинации. После дифференцировки они пролиферируют в патоген-специфические клоны Т-клеток, которые обнаруживаются в периферической крови как эффекторные Т-клетки и Т-клетки памяти. Регуляторные Т-клетки подавляют иммунный ответ. Как и эффекторные Т-клетки, они образуются путем дифференцировки из наивных Т-клеток. Баланс между активированными эффекторными Т-клетками и регуляторными Т-клетками имеет решающее значение для эффективного и защитного иммунного ответа. Нарушенный баланс может лежать в основе аутоиммунного заболевания или хронического воспалительного процесса.
Метод EliSpot позволяет получить представление об этих регуляторных процессах. Он может применяться в самых разных областях и использоваться для визуализации как острых заболеваний, так и хронических воспалительных процессов. Также возможен мониторинг терапии.

Показания
Косвенное выявление ранее перенесенного заболевания COVID-19 Особенно у бессимптомных пациентов или пациентов с легкими симптомами часто отсутствуют или только низкие титры антител, которые часто снова быстро снижаются. Многие люди уже уничтожают коронавирус с помощью своей клеточной иммунной системы до образования антител. Обнаружение Т-эффекторов или клеток памяти, специфичных для SARS-CoV-2, позволяет эффективно выявлять предыдущие инфекции COVID-19.

Выявление клеточного иммунитета
Если удается обнаружить клоны Т-клеток, специфичных для SARS-CoV-2, это не только свидетельствует о предыдущем контакте с вирусом, но и может указывать на наличие клеточного иммунитета. Это особенно актуально, если обнаружение IL-2 или комбинированное обнаружение IL-2 и INF-γ свидетельствует о наличии клеток памяти. Согласно первым исследованиям, специфические для SARS-CoV-2 Т-клеточные реакции остаются обнаруживаемыми в CoV-iSpot в течение длительного времени. Относительно недолговечные ответы антител, но долговременный Т-клеточный иммунитет, что означает, что SARS-специфические Т-клетки памяти все еще могут быть обнаружены у пациентов с атипичной пневмонией 2003 года в 2020 году.

Указание на возможный базовый иммунитет
В CoV-iSpot для стимуляции лимфоцитов используются и другие патогенные для человека коронавирусы, чтобы прояснить вопрос о базовом иммунитете через клеточную иммунную систему после предыдущего контакта с коронавирусами, которые эндемичны во всем мире. Если есть доказательства PAN-коронавирус-специфических Т-клеточных ответов в CoV-iSpot и эти пациенты не заболевают или развивают только слабые симптомы после SARS-CoV-2 инфекции, то клеточный базовый иммунитет кажется очень вероятным. В пользу клеточного базисного иммунитета говорит и тот факт, что у пациентов с реактивным ответом на коронный пептид PAN часто не обнаруживаются антитела к SARS-CoV-2. Инфицированные вирусом клетки уничтожаются Т-эффекторными клетками до того, как происходит образование антител через стимуляцию плазматических клеток.

Предстоящий сезон гриппа
Предстоящий сезон гриппа, скорее всего, увеличит число случаев подозрения на SARS-CoV-2. С помощью CoV-iSpot мы получили современный метод клеточного тестирования для дифференциации гриппа и инфекции COVID-19. В частности, недавние данные о потенциальном клеточном иммунитете к SARS-CoV-2 и предположительно существующем базовом иммунитете через перекрестно реагирующие Т-клетки могут дать дополнительную уверенность.